LC-MS（液相色譜-質譜聯用技術）是一種結合了液相色譜（LC）和質譜（MS）的分析技術，廣泛應用于復雜樣品的分離和鑒定。以下是工作原理：

1. 液相色譜（LC）部分

液相色譜用于分離樣品中的各組分，基本原理是利用不同組分在流動相和固定相之間的分配差異實現分離。

工作流程：

• 樣品注入：樣品溶液通過進樣器注入色譜系統(tǒng)。

• 流動相輸送：高壓泵將流動相（液體溶劑）輸送至色譜柱。

• 分離過程：樣品中各組分在色譜柱中與固定相（填充材料）發(fā)生相互作用，因分配系數不同而以不同速度通過色譜柱，實現分離。

• 檢測器：分離后的組分依次流出色譜柱，進入檢測器（在LC-MS中，檢測器為質譜儀）。

2. 質譜（MS）部分

質譜用于對分離后的組分進行鑒定和定量分析，基本原理是將分子離子化后，根據質荷比（m/z）進行分離和檢測。

工作流程：

• 離子化：從LC流出的組分進入質譜儀的離子源，被離子化。常見的離子化方式有：

• 電噴霧離子化（ESI）：適用于極性化合物。

• 大氣壓化學離子化（APCI）：適用于非極性或弱極性化合物。

• 其他離子化方式：如MALDI、APPI等。

• 質量分析：離子化后的分子進入質量分析器，根據質荷比（m/z）進行分離。常見的質量分析器有：

• 四極桿（Quadrupole）：通過電場篩選特定m/z的離子。

• 飛行時間（TOF）：根據離子飛行時間分離。

• 離子阱（Ion Trap）：捕獲并分離離子。

• 軌道阱（Orbitrap）：利用靜電場分離離子，具有高分辨率。

• 檢測器：分離后的離子到達檢測器，產生信號，信號強度與離子數量成正比。

3. LC-MS聯用技術

LC-MS將液相色譜的分離能力與質譜的高靈敏度和特異性結合，適用于復雜樣品的分析。

工作流程：

1. 樣品分離：樣品通過液相色譜分離成單一組分。

2. 組分轉移：分離后的組分依次進入質譜儀。

3. 離子化與分析：組分在質譜儀中被離子化并分析。

4. 數據采集：質譜儀生成質譜圖，顯示各組分的信息（如分子量、碎片離子等）。

5. 數據處理：通過軟件分析質譜數據，鑒定化合物并定量。

4. LC-MS的主要特點

• 高靈敏度：可檢測極低濃度的化合物。

• 高選擇性：通過質譜的精確質量測定，區(qū)分結構相似的化合物。

• 廣泛應用：適用于藥物分析、環(huán)境檢測、食品安全、代謝組學等領域。

• 復雜樣品分析：可同時分離和鑒定復雜混合物中的多種組分。

5. LC-MS的應用

• 藥物分析：藥物代謝物鑒定、藥代動力學研究。

• 環(huán)境檢測：水中污染物、農藥殘留分析。

• 食品安全：食品添加劑、毒素檢測。

• 生命科學：蛋白質組學、代謝組學研究。

• 臨床診斷：生物標志物檢測、疾病診斷。

6. LC-MS的優(yōu)缺點

優(yōu)點：

• 高靈敏度和特異性。

• 可同時進行定性和定量分析。

• 適用于復雜樣品的分析。

缺點：

• 儀器成本高，維護復雜。

• 樣品前處理要求較高。

• 對操作人員的技術要求較高。